包被液里的几种添加剂：缓冲体系、、、、糖、、蛋白、、、表面活性剂各有什么用
免疫层析试纸条的包被液，，，不只是抗体加缓冲液那么简单。。
划到NC膜上的检测线（T线）和质控线（C线），，需要同时满足几个要求：抗体要能稳定地吸附在膜上、、、、线条要清晰锐利等。。。
这些要求单靠抗体和缓冲液很难同时满足。。。所以包被液里通常会加一些辅助成分——选择合适的缓冲体系、、糖类、、、蛋白类添加剂、、、、表面活性剂。。。每种添加剂解决不同的问题，，，加对了能明显改善线型和稳定性，，加错了反而添乱。。。。
下面把几种常用添加剂的作用和用法拆开讲。。。
一、、、、缓冲体系：决定蛋白能不能吸附上去
缓冲液是包被液的基础。。。。它的作用不只是把抗体溶解，，，，更重要的是提供合适的pH和离子强度，，让蛋白能够牢固地吸附到NC膜上。。
pH怎么选
NC膜与蛋白的结合依赖于静电相互作用。。。。pH直接影响蛋白的带电状态。。。。如果pH偏离蛋白的等电点太远，，蛋白和膜之间的静电作用力不够，，，，吸附效率就会下降。。。
用什么缓冲盐
常用的缓冲盐有PB（磷酸盐）、、Tris、、、碳酸盐（CB）、、、、硼酸盐（BB）等几种。。磷酸盐缓冲液（PB）是最常用的选择，，，因为它配方简单、、pH稳定、、、、兼容性好。。。。
离子强度要低
这是一个容易被忽略的点。。。含150mM NaCl的盐缓冲液在NC膜上不容易形成清晰的蛋白线条，，因为高离子强度干扰了蛋白结合所必需的静电相互作用。。。
包被液首选低离子强度缓冲液（如10-20mM PB），，，，尽量不要用PBS（含150mM NaCl）。。。PBS里的盐会屏蔽蛋白与膜之间的静电作用，，，导致吸附不牢、、、线条扩散。。。
二、、糖类：保护抗体，，改善线型
糖类是包被液里最常用的添加剂之一。。。蔗糖和海藻糖是两种主流选择。。。。
蔗糖
最常见，，，成本低。。。蔗糖在干燥过程中能形成玻璃态基质，，，，把抗体分子固定在活性构象里，，防止干燥变性。。。。
海藻糖
保护效果比蔗糖更好，，，，玻璃化转变温度更高，，吸湿性更低。。。在需要长期储存或高温环境下，，海藻糖的优势更明显。。。。
两种糖可以配合使用。。蔗糖和海藻糖各有优势，，，复配使用可以同时利用蔗糖的低成本和海藻糖的高保护性。。。
糖能解决什么问题
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线条出现“反白”（中间淡、、边缘深），，，，加糖有改善作用 -
抗体在干燥过程中活性下降，，，，加糖保护 -
储存后信号衰减快，，，加糖延长货架期
需要注意：糖不是越多越好。。。浓度过高会导致干燥后线型扩散或线条变宽。。。如果T线出现过宽或中空，，，，可以先考虑把糖浓度降下来。。。。
三、、蛋白类添加剂：保护抗体，，，，辅助封闭
包被液里最常用的蛋白添加剂是BSA（牛血清白蛋白）。。
BSA在包被液里的作用
BSA在包被液里的作用主要有两个：一是作为载体蛋白，，，，保护低浓度抗体在干燥过程中不变性；二是辅助封闭NC膜上未结合的位点，，减少后续层析中的非特异性吸附。。。。
注意事项
BSA浓度不能太高。。。。BSA和抗体都在竞争NC膜上的结合位点。。BSA浓度过高，，，可能抢占抗体与膜的结合空间，，，，反而降低T线信号。。。。
如果项目本身信号足够强、、、、背景也不脏，，，包被液里可以不加BSA。。
四、、、、表面活性剂：控制线型，，，防止中空
表面活性剂在包被液里的作用比较特殊。。。它主要用来改善线条形态，，防止出现“中空”或“锯齿”现象。。。。
Tween-20
最常用的非离子表面活性剂。。包被液中加入少量Tween-20，，，可以增加亲水力，，避免线条中空现象。。。
Tween-20的用量必须严格控制
NC膜上结合的蛋白会被去污剂置换。。。。包被液中Tween-20浓度过高，，，，可能竞争性抑制蛋白与膜的吸附，，，导致线条信号减弱甚至脱落。。
如果表面活性剂加在样品垫处理液或结合垫处理液里，，，对NC膜的影响会小很多。。。。包被液里加表活要格外小心。。。。
五、、、添加剂浓度参考
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以上建议浓度均需要结合实际梯度实验结果确定用量。。。。
