His标签抗体原料：免疫层析检测His融合蛋白的核心工具

His标签是目前重组蛋白表达和纯化中最常用的标签之一。
。。它由6个连续的组氨酸残基组成。。
。组氨酸的咪唑环能与镍离子等过渡金属离子发生特异性螯合，，利用这一原理可以通过固定化金属离子亲和层析（IMAC）纯化带有His标签的重组蛋白。。
。
。

His标签分子量小（约0.8kDa），，
，，通常位于重组蛋白的N端或C端
，，，不太可能干扰靶蛋白的结构或功能
，，，也适合在变性条件下使用。。在免疫层析检测中，，His标签抗体是识别和捕获His融合蛋白的核心原料。。。

一、
、
、、His标签的特点

His标签由6个组氨酸组成，，分子量约0.8kDa。。与其他常用标签（如GST
，
，，，30kDa）相比，，
，，尺寸小，，，，不太可能干扰靶蛋白的结构或功能
。。
。

His标签可以添加在重组蛋白的N端或C端。。。由于咪唑环能与固定化的镍离子等金属离子形成配位键
，
，，，His标签广泛用于通过IMAC纯化蛋白。。。His抗体能够识别并特异性结合这些标签序列，，，，可用于检测重组蛋白的表达、、、纯化及定位
。。。。

二、、His抗体在免疫层析平台中的应用（竞争法检测模式）

竞争法是His标签蛋白检测中最常用的模式。
。。
。其基本原理如下：

试纸条结构由样品垫、
、、金标垫、
、NC膜、
、吸水纸和背板组成。。
。试剂卡检测线包被的为带有His-tag的蛋白，，，，对照线包被的为相对应的二抗，，金垫标记为His抗体。。

• 阴性样本（不含His标签蛋白）：样本通过金标垫时，
  ，金标His抗体随层流移动到检测线位置
  ，，与固定在T线上的His标签蛋白发生特异性结合，，
  ，
  ，在T线形成条带
• 阳性样本（含有His标签蛋白）：样本中的His标签蛋白与金标His抗体结合，，，，形成“金标抗体-His蛋白”复合物
  ，，，，消耗了游离金标抗体。。剩余的游离金标His抗体越少，，，，到达T线后与固定His蛋白结合的就越少，，T线显色随之减弱

阳性样本中His标签蛋白浓度越高，
，，
，T线信号越弱，，，，直至消线。。无论样本中是否存在His标签蛋白，，都会向上层析至C线，，，与包被在C线的二抗反应形成条带，，用于判断层析过程是否正常。。
。。

竞争法的适用场景：竞争法适用于检测重组蛋白的His标签融合蛋白表达产物。。。。可以用于检测细胞培养上清
、、、、细胞/细菌裂解产物或蛋白纯化后的His标签蛋白。
。
。
。

三、、、产品优势

• 高特异性识别

• 高纯度与低批次间差异

• 免疫层析平台适配性

• 多种应用模式支持

四
、、、、客户应用反馈

使用博梵Biofonnx his抗体，，制备His标签检测卡，
，搭配胶体金免疫分析仪在蛋白表达和纯化上的应用案例

实验结果
：尊龙时凯His抗体原料在竞争法检测模式下，，，
，T线信号随浓度升高呈现梯度减弱趋势。。该抗体原料检测梯度清晰、、、、消线明显
，，可用于His融合蛋白表达检测等应用场景。。
。